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關于液相維護的相關知識與經驗

點擊次數:1204 發布時間:2009-12-07

一、混合溶劑必須要過濾以后才能混合,萬一要混合后過濾的話,只能用有機的,不能用水系的。因為水系的材料是纖維素,有機相回或多或少的溶解一點纖維素的,造成污染。

  二、標樣或樣品用流動相溶解(排除特殊情況),可以避免很多麻煩。

  三、給色譜柱加溫,溫度升高的目的,部分在于增加溶質的溶解度,但更重要的是降低溶劑的黏度,從而改進峰形和分離度。注意:溫度升高會降低保留時間,這對分離度也有影響,溫度的變化對譜帶寬度的影響甚大,而塔板高度受溫度的影響雖然也取決于所采用的色譜類型,而溫度升高總是要降低塔板高度的。

  四、C18柱的柱溫一般不要超過40攝氏度,否則健合相容易脫落的。

  五、進樣器使用,除每次用水清洗外,隔一段時間后,用甲醇或乙腈反復吸取,清洗一下。

  六、用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?

  答:關于漂移問題:

  1、溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定

2、流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等

  3、柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡

  七、關于快速變化問題:

  1、流速發生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持穩定

  2、泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。

  3、流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合

  八、液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么?

  1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。

  2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子

  九、毛細管色譜分流進樣時,非線性分流的主要原因是什么?

  1、進樣器溫度太低,樣品汽化不完全,發生分級分流。

  2、進樣器溫度太高,某些組分可能發生熱分解,也有的樣品可能發生催化分解,或樣品部分地被吸附在進樣器內表面上。

  3、在分流點以前樣品沒有混合均勻或混合不充分。

  4、系統的進樣墊,柱接頭等地方漏氣。

  十、做HPLC分析時,柱壓不穩定,原因何在?如何解決?

  答:原因可能有:

  1、泵內有空氣,解決的辦法是清除泵內空氣,對溶劑進行脫氣處理;

  2、比例閥失效,更換比例閥即可。

  3、泵密封墊損壞,更換密封墊即可。

  4、溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;

  5、系統檢漏,找出漏點,密封即可。

  6、梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。

  十一、做PGS/MS分析時,如何防止焦油狀污染物進入毛細柱?

  答:聚合物,尤其是一些含氮、硫及鹵素的高分子裂解時,常有焦油狀物質產生。為防止這種焦油狀物質進入毛細柱造成污染而使柱性能下降,可采用保護預柱,即在裂解器與毛細柱之間接一填充預柱,通過控制預柱溫度而使焦油狀物質滯留在預柱內,預注可置于GC氣化室內,這樣既容易控制溫度,又減少系統的死體積,當然,預柱填料需經常更換。

  十二、我zui近更換了另一種牌號的ODS柱,雖然分離情況仍可以,但保留時間不能重現,為什么?

  答:這是因為被分析物可能具有形成氫健的能力。盡管過去幾年來,填料的制造技術有了極大的提高,但不同的廠商的ODS 填料表面硅醇基的濃度不同。正是這些硅醇基可能與樣品發生相互作用。因此,同一被分析物中的各組分在不同牌號的ODS 柱上的相對保留時間就可能不同。在流動相中加入少量競爭物,如三乙基胺(TEA),將會使硅醇基的成鍵能力飽和,從而保證不同牌號柱子上的相對保留時間具有較好的重現性。

  十三、高溫毛細柱的使用壽命一般為多長?

  答:毛細柱壽命除決定于柱子本身的性能外,在很大程度上取決于使用情況,比如使用溫度、樣品狀態,進樣量等,如果在其使用溫度范圍內,樣品干凈,色譜柱不被污染的情況下,柱子壽命一般在2—3年之間。

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